癌症研究
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可溶性FasL联合survivin RNA干扰诱导肺腺癌细胞凋亡

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    摘 要:目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响.方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹 (Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达.sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率.结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞.Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4%(P<0.01)和84.5%,免疫组化也显示survivin下调.sFasL联合survivin RNA干扰细胞,光密度值在各时间点较siRNA组、sFasL组和对照组均明显降低(P<0.01),抑制率增加;凋亡率较siRNA组、sFasL组和对照组明显增加(P<0.01).结论:Survivin RNA干扰表达载体可降低survivin的表达.sFasL 联合survivin RNA干扰较单用sFasL或survivin RNA干扰能更有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,促进凋亡.
关键词:细胞系,肿瘤;RNA干扰;细胞凋亡;Fas配体蛋白(刘黎明  陈昌杰  陈正徐  胡博  段光军  胡华成 肿瘤
2007年8期)

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